바이러스 제거 필터 및 지속적인 생물공정 과제

이 웹캐스트의 내용은 다음과 같습니다.Kathleen McLaughlin, BioProcess R&D 수석 과학자, Merck & Hironobu Shirataki, 박사, Asahi Kasei Medical 바이오프로세스 부문 글로벌 마케팅 과학부 수석 컨설턴트.

이번 웹캐스트에는 두 가지 프레젠테이션이 있습니다.

Kathleen McLaughlin의 단클론 항체의 연속 생물공정에서 Planova™ BioEX 바이러스 제거 필터 평가

표준 배치 단일클론 항체 생물학적 제제 제조 공정은 비용과 시간이 많이 소요됩니다. 강화된 연속 처리로 전환하면 훨씬 더 높은 생산성, 특히 25일 이상의 생물반응기 및 17일 이상의 다운스트림 작업에 걸쳐 1.5g/L/일을 초과할 수 있습니다.

우리의 혁신적인 플랫폼은 다양한 규모와 위치에서 테스트되었습니다. 시차를 두고 시작하고 종료하는 작업 사이에서 자동으로 엔드투엔드를 작동합니다. 업스트림 프로세스가 시작되고 특정 임계값에 도달하면 다운스트림 프로세스가 자동으로 시작됩니다. 안정적인 대량 처리량이 달성되면 다음 단위 작업이 시작됩니다.

연속 제조 중 주요 과제에는 특히 바이러스 제거에 중요한 공정 일시 중지 관리와 운영 관점에서 빈번한 필터 전환 처리가 포함됩니다.

이 프레젠테이션에서는 바이러스 여과 단계의 공정 개발에 초점을 맞춘 머크의 지속적인 제조 전략에 대한 개요를 제공합니다. 여기에는 두 개의 나노필터에 대한 부하량, pH 및 전도도에 대한 평가가 포함되며 부하 pH가 가장 중요한 요소입니다. 이로 인해 Planova BioEX가 바이러스 제거 필터로 선택되었고 21일에 걸쳐 지속적인 제조 과정에서 이 필터를 사용하게 되었습니다(우리가 아는 최초의 것 중 하나).

Planova™ BioEX 및 S20N 바이러스 제거 필터의 일정한 유속 바이러스 제거 연구 및 MAb 정제를 위한 종단 간 연속 공정 구현 - Hironobu Shirataki, PhD

바이러스 여과는 다운스트림 처리의 마지막 부분에 위치하며 바이오의약품에서 바이러스를 제거하는 중요한 단계입니다. 그러나 바이러스 여과를 연속 공정에 통합하기 위한 연구 및 기술 개발은 여전히 ​​진행 중입니다. 제안된 솔루션 중 하나는 컬럼 크로마토그래피 공정 후에 필터를 통합하는 것이지만, 시스템 전체의 처리 용량과 유속의 균형, 바이러스 필터 견고성에 영향을 미치는 공정 일시 중지, 장기간 여과 시 압력 안정성과 같은 과제가 있습니다.

우리는 일정한 유속 하에서 통합 컬럼 크로마토그래피 및 바이러스 여과 설정에서 단클론 항체(MAb) 공정에 대한 여과 거동 및 바이러스 제거 능력을 조사했습니다. 혼합 모드 AEX 및 수정된 CEX 컬럼은 0.0003m2 Planova BioEX 바이러스 필터가 연결된 풀 없는 통합 설정에서 직렬로 실행되었습니다.

필터 견고성을 조사하기 위해 인라인 스파이크 테스트 방법을 사용하여 필터에 대한 바이러스 제거 테스트를 수행했습니다. 바이러스 돌파에 대한 우려를 해결하기 위해 바이러스 여과 단계 동안 MAb 용액 로드와 회수 플러시 사이에 60분 동안 프로세스를 일시 중지했습니다. 통합 설정에서 처리된 정량화된 숙주 세포 단백질 함량을 갖는 MAb 용액은 높은 HCP 감소 및 높은 MAb 회수율을 달성했습니다. 40 LMH 일정한 플럭스에서의 인라인 바이러스 스파이크 테스트는 강력한 MMV 바이러스 감소를 나타냈습니다.

2개의 컬럼 직렬 공정은 또한 Planova BioEX 필터에 대해 5LMH 미만의 유량에서도 5보다 큰 바이러스 LRV를 생성하는 MMV 테스트를 통해 높은 바이러스 감소를 보여주었습니다. 따라서 두 개의 컬럼과 바이러스 필터를 직접 연결하는 확인된 통합 설정이 End-to-End 연속 공정에 구현되었습니다.

이 과정에서 생산 배치 개념을 명확히 하기 위해 자동 pH 제어를 통해 배치 바이러스 불활성화를 수행했습니다. 관류 세포 배양부터 바이러스 여과까지 높은 정제 및 회수율을 갖춘 안정적인 MAb 연속 공정이 이 공정을 통해 입증되었습니다.